上海秉越（yuè）電子儀器有（yǒu）限（xiàn）公司

培（péi）養基的滅菌及使用

1.每次配置（zhì）時，要注意其（qí）生產日（rì）期是否在保質期內，查看（kàn）其開瓶日期及瓶口密封（fēng）性，保（bǎo）證其未變質，並（bìng）且未吸潮。
2.培養基配置時，稱量要準確，包括鹽水的分裝要準確。
3.一定要保證現配製現滅菌，未滅菌的配好培養基不能長時間放置，更不（bú）可隔夜。
4.滅（miè）菌時要保證恒溫、恒壓，同時要保證有效滅菌時間。
5.滅菌過的培養基要冰箱保存，可（kě）保存一（yī）周，一般不超過 3 天。而且要遵（zūn）循“先入先出”原則，先配製的要先使用。
6.在（zài）使用（yòng）時，要根據當班次的使（shǐ）用（yòng）量，用（yòng）水浴鍋先將培養基溶化為液態，然後及時調低水域溫度（先化好的可從水域取（qǔ）出，放在水浴鍋鍋蓋上）待用，千萬不可（kě）長時（shí）間使培養基處於高溫狀態。
7.做產品微生物檢測時，傾倒培養基溫度在 45℃左右，不可過燙，避免將菌燙死；也不可過涼，化好的培養基（jī）又結塊凝固，不便於觀察結果（guǒ）。
8.每（měi）瓶（píng）培養基均要做空（kōng）白。
9.盡量集（jí）中做樣（yàng），避（bì）免（miǎn）頻繁打開同一瓶培養基瓶塞，增大培養基的汙染幾率，出現誤差結果。
10.培養（yǎng）基剩餘（yú）過少時，可先將其（qí）傾倒成空白用（yòng）板。

做樣環境的維持

一、大環境（房間）
1.做樣時，窗戶和空調要關閉，或用酒精對房間進行噴霧消毒，避免房（fáng）間內空氣流通影（yǐng）響超淨台內部環境（jìng）（在有通排風係統的恒溫恒濕無菌間進行操作）。
2.如果在原來的（de）原料微生物檢測室進行做樣，要定期開啟紫（zǐ）外燈，對房間進（jìn）行殺菌。
二、小環境（超淨台（tái））
1.定期清潔（jié）初效過濾器，要及時更換。
2.做樣前，將超淨台內部進行清潔，用 75%酒精進行擦拭消毒（dú），並提前半小時將超淨台紫外燈打開，對超淨（jìng）台內部環境進行殺菌。
3.關紫外燈，開風機，調整合適（shì）進風量（liàng），風量不可（kě）過低。
4.每次做樣後，要對（duì）超淨台（tái）內部（bù）進行清理、清潔，並用（yòng） 75%酒精進（jìn）行擦拭消（xiāo）毒。
5.紫外燈根據其使用壽命要及時更換。
6.做（zuò）樣同時，要做上相應菌落檢測的環境空白。
7.做樣區域（yù）的選擇：
①一般在距離超淨台外沿的 1/3-2/3 區域進（jìn）行無菌操作（zuò）；
②要在酒精燈火焰的外焰保護區（qū）域（yù）進行操作。

 工器具的潔淨度

1.玻璃器皿：采用幹熱滅菌（jun1）方式進行滅菌。

2.做樣用（yòng）剪刀（dāo）、勺子等物品要做到做樣專用，不可與其它操作器具混用，使用（yòng）時，先用75%酒精消毒（dú），再采用灼燒方式進（jìn）行滅菌。

3.接種針（環）采用（yòng）灼燒（shāo）方（fāng）式進行滅菌，但要注意做（zuò）樣時要先將接種針（zhēn）（環）進行冷卻。

樣品的采集及檢測

一、保證采樣器具的無菌性
1.玻璃器皿：采用幹（gàn）熱滅菌方式進行滅菌，保證（zhèng）恒溫、時間足（zú）夠（但不可時間過長，導致玻璃器皿易裂紋而報（bào）廢）。
2.取樣（yàng）筐：使用前要用 75%酒精（jīng）進行噴灑消毒
3.取（qǔ）樣勺、濃奶取（qǔ）樣提子：要保證其清潔消毒，清潔後用 75%酒精進行擦拭消毒。
4.取樣袋：可現用酒精進行擦拭消（xiāo）毒，再在超淨台用紫外燈照射消毒，（包裝車間（jiān）要在傳遞窗（chuāng）用紫（zǐ）外燈（dēng）照射消（xiāo）毒）。
5.電子稱表（biǎo）麵用 75%酒精消毒。

二、人員操作
1.保證手部的清洗、消毒：取樣前及做樣（yàng）前都要先（xiān）洗手再消毒。
2.取樣要具有代表性（隨機樣、目的樣、綜（zōng）合樣）且要標示清楚。
3.取樣完畢，不可在車間逗（dòu）留，要及時將樣品放入超（chāo）淨台，對其外表麵進行紫外燈照射消毒。
4.在要求的做樣區域進行（háng）操作。
5.做樣前，要用 75%酒（jiǔ）精（jīng）棉球對樣品袋口部進（jìn）行擦拭消毒，再開口。
6.往鹽水瓶加樣品時，要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。
7.樣（yàng）品計量要準確，稀釋倍數也（yě）要準確（què）（1mL 吸管不（bú）允許將（jiāng）管口敲掉），進行 100 倍稀釋時，1mL 吸管要伸入鹽水中，不可以將樣品管壁流（liú）下去，同時要避免將管底部捅破。
8.鹽水溫度（dù）以 40℃左右為宜，不能過熱，將部分微生物燙死，也不能溫度太低，不能將奶粉溶解完全。
9.進行稀釋時，要搖（yáo）勻，保證溶（róng）液的均一性（xìng）。
10.傾倒平（píng）皿時，要注（zhù）意培養基瓶口不要接觸到平皿；傾倒的培養基（jī）要適量，不可（kě）以太少，在培養過程中幹掉，微生物亦死亡，以 15mL 左右為宜。
11.做大腸菌群樣時，要提前將乳糖膽鹽培養基培養管按需要量備好，放入超淨台對外表麵進行紫外線滅菌。
12.接二步時（shí），要注意先將接種針（環）進行冷卻，避免出現接不上菌落的情況發生，導致無法判斷、確（què）認。
13.做（zuò）樣完畢，及時放入相應培養箱進行培養，並清理清潔超淨台。