上海秉越電子儀器有限（xiàn）公司

一、微（wēi）生物實（shí）驗室注意事項

1、工作室（shì）要矮小平（píng）整、光滑、無凹凸不平或（huò）棱角、四壁及屋頂用不透水之材質，便於擦洗及殺菌。

2、室內采光麵積應大，從室外應能看到室內的情況。

3、為保證無菌室的潔淨，無菌室周圍（wéi）需設緩衝走廊，走廊旁（páng）再設緩衝（chōng）間，其麵積可小於無菌（jun1）室。

4、無（wú）菌室、緩衝走廊（láng）及緩衝間均設有日（rì）光燈及紫外燈（dēng），殺菌紫外（wài）燈離工作台以一米為宜，其電源開關應設（shè）在室外。

5、無（wú）菌室與緩衝間進出口應設推拉門，門（mén）與窗平齊，門縫要封緊，兩門要（yào）錯開，以免空氣對流造成汙染（rǎn）。

二、使用無菌室注意（yì）事項

1、無菌室要保持清潔整齊，室內僅存放必要的檢驗（yàn）用品（pǐn），如（rú）：酒（jiǔ）精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環、記號鉛等。

2、室內檢驗（yàn）用（yòng）具及桌凳應保持固定位置，不隨便移動（dòng）。

3、每2周用2%消毒液（二氧化氯等）水溶液擦拭（shì）工作台、門、窗、桌凳及地（dì）麵，然後用二氧（yǎng）化氯溶液噴（pēn）霧消毒（dú）空（kōng）氣或（huò）過氧乙酸熏蒸，紫外燈殺（shā）菌。

4、定期檢查室內空氣無菌狀態，進行細菌和黴菌的檢查（chá）。

5、無菌室殺菌前（qián）應將所（suǒ）有（yǒu）物品置於（yú）操作之部位，然後打開紫外燈殺菌半小時，時（shí）間一到，關閉紫外燈待用。

6、操作應嚴格按照無菌操作規定進（jìn）行（háng），操作少說話，不喧嘩，以保持（chí）環境的無菌狀（zhuàng）態。

三、配製培養基注意事項

1、滅菌時嚴格按照規定加熱、加壓，切（qiē）忌時間過長壓力過高（gāo），否則會造（zào）成營養成分的破壞。

2、切忌使用銅鍋、鐵鍋配製培（péi）養基（jī）。

3、培養基（jī）不能二次高壓滅菌（jun1）。

4、劃線用培養基可放入冰箱或培養箱除去水分。 

四、無（wú）菌操作注意（yì）事項

1、進入無菌室之前先進（jìn）行空氣消毒，工（gōng）作人員（yuán）進入無菌室以前，必須於緩衝間更換消毒過的工作服、工作帽（mào）及工作（zuò）鞋。

2、動作要輕，盡量減少走（zǒu）動，以免攪（jiǎo）動（dòng）空氣。

3、操作（zuò）要靠近酒精燈火焰區，使（shǐ）用吸管要用吸球。

4、接種環/接（jiē）種針用前用（yòng）後進行火焰滅菌。

5、工作結束（shù）作好終末消毒，所（suǒ）有培養物均應高壓滅菌後再扔掉，以免汙染環境。

 

五、菌落總數測定注意事項

1、選取樣（yàng）品要有代表（biǎo）性（xìng），如為固體樣品要多采幾個部位，液體檢（jiǎn）樣要混勻。

2、每次做樣從開始到結束（shù）都要進行超淨台空氣淨度的監測，同時對所有滅菌物品做空（kōng）白對照。

3、為減少稀釋倍（bèi）數的誤差，在做連續遞增稀釋時，每一稀釋液應充分振搖使其均勻，同時每一稀釋度換一支吸管。

4、在進（jìn）行連續稀釋時，應將（jiāng）吸管內液體沿壁流入，勿使吸管尖端觸及稀（xī）釋液。

5、傾倒營養瓊脂培（péi）養基平板時，溫度要在46±1℃之間，數（shù）量要在15ml左右為宜，不要太多太少。

6、培養物48h培養後培養基失重不超過15%，培（péi）養箱內要（yào）放水。

7、檢（jiǎn）樣加入平皿後應立即傾注培養基並旋轉混勻，一般從稀釋到（dào）傾（qīng）注不超過20分鍾。

8、平皿內（nèi）如有鏈狀菌落生長時：菌落（luò）之間無明顯界限且僅有一條鏈（liàn）可視為一個菌落（luò），如為不同來源的幾條鏈則將每條鏈各做一個菌落（luò）記。

9、做（zuò）菌落記數時平板裏所有的菌落都要記數。

 

六、大腸菌群注意事項

1、對乳糖膽鹽管產氣（qì）的觀察隻要有（yǒu）氣泡往上（shàng）冒就算產氣。

2、在伊紅美蘭瓊（qióng）脂平板上挑取菌落時（shí）一定要選典型菌落。

 

七、黴菌、酵母菌（jun1）檢驗注意事項

1、稀釋樣品時用無菌水。

2、3天觀察時（shí）把所有的酵母菌做（zuò）標記。

3、如果有黴菌被培養出，請不要把皿蓋隨便（biàn）打開，待培養物高壓滅菌後再清洗。

 

八、壞包分析注意事項

1、對已開包的酸（suān）包脹包要馬上轉移到無菌瓶中，已（yǐ）防二次汙染。

2、根據壞包的不同表現狀態適當的選擇培養項目。

3、做微生物培養的同（tóng）時測定感（gǎn）官、理化指標，注意其（qí）有何變化。

 

九、商業無菌注意事項

1、要求有厭氧（yǎng）培養的一定要在厭氧環（huán）境下培（péi）養。

2、取樣測pH值（zhí），要與同批正常樣相比，看是否（fǒu）有顯著差異。

3、對（duì）pH 值有可疑的樣品都（dōu）要做塗片染色鏡檢，與同批正常樣（yàng）相比，看是（shì）否（fǒu）有明顯的微生物增殖現象。

4、保溫期間出現的脹包，漏包、或開包發現PH、感官異常、變質，進一（yī）步（bù）鏡（jìng）檢發現有異常數量細菌的樣品均應進行劃線培養。